这不是一个与YAML相关的问题，而是一个与yaml无关的Python代码中的概念问题。
通过给键Machine赋一个dict作为值，你设置了那个值。通过给键赋另一个dict，你完全覆盖了那个值，擦除了以前的键值对。
如果简化代码：

data = dict(Machine=None)
data['Machine'] = dict(node_labels='+> tfs vs2022')
print('data 1', data)
data['Machine'] = dict(vs='vs2022')
print('data 2', data)

正如您在第二次赋值后所看到的，键node_labels不再可用。

data 1 {'Machine': {'node_labels': '+> tfs vs2022'}}
data 2 {'Machine': {'vs': 'vs2022'}}

有几种方法可以解决这个问题。你可以给第一个字典中的键赋值：

data = dict(Machine=None)
data['Machine'] = added_dict = dict(node_labels='+> tfs vs2022')
print('data 1', data)
added_dict['vs'] ='vs2022'
print('data 2', data)

现在，您在第二个输出中有了两个密钥：

data 1 {'Machine': {'node_labels': '+> tfs vs2022'}}
data 2 {'Machine': {'node_labels': '+> tfs vs2022', 'vs': 'vs2022'}}

如果你还不知道有一个字典可以添加一个键，你可以使用.setdefault，或者使用键值赋值，和/或使用.update（对于一次更新多个键很有用）：
第一个
当然，你可以把node_labels和vs放在一个dict中并赋值，但是这会覆盖从YAML加载的任何现有键值。所以使用.update是IMO更好的选择：

import sys
from pathlib import Path
import ruamel.yaml

file_in = Path('input.yaml')
# key in YAML mapping with null value
file_in.write_text("""\
WIN:
""")
    
yaml = ruamel.yaml.YAML()
data = yaml.load(file_in)
if data['WIN'] is None:
    data['WIN'] = {}
data['WIN'].setdefault('Machine', {}).update(dict(node_labels='+> tfs vs2022'))
data['WIN'].setdefault('Machine', {}).update(dict(vs='vs2022'))
yaml.dump(data, sys.stdout)

这将给出预期结果：

WIN:
  Machine:
    node_labels: +> tfs vs2022
    vs: vs2022